How could we detect circulating tumor cells in lung cancer patients? A brief study by flow cytometry

Authors : Özen Özensoy Güler, Tuğba Uysal, Ender Şimşek, Ahmet Çarhan

Pages : 179-189

Doi:10.26453/otjhs.410582

View : 25 | Download : 11

Publication Date : 2018-12-29

Article Type : Research

Abstract :Dolaşımdaki tümör hücreleri (CTC’ler) karsinomların metastatik yayılımında önemli role sahiptir. Bu nedenle, son yıllarda birçok kanser türünde hastalığın seyri ve tedavi etkinliğinin anlaşılmasında yardımcı olabileceği düşünülen CTC’ler üzerine yoğunlaşılmıştır. Teknik yaklaşımlardaki gelişmeler ile özellikle akciğer kanseri gibi dokularına ulaşılması zor olan tümörlerde sıvı biyopsi olarak tüm kandan CTC tespitinin değeri her geçen gün artmaktadır. Tanı anında sıklıkla metastaz yaptıkları teşhis edilen akciğer kanseri, hem kadınlarda hem de erkeklerde kanser ölüm nedenlerinin birincil sebebidir. Çalışmamızın amacı akım sitometrisi ile akciğer kanserli hastaların periferik kan örneklerinde (7.5 mL) CTC tespitidir. Zenginleştirme ve saptama adımlarından oluşan modifiye ettiğimiz yöntemimiz ile CTC sayısının tespit edilmesi için 9 akciğer kanserli birey ve 9 sağlıklı birey çalışmaya dahil edilmiştir. Uyguladığımız metotta zenginleştirme basamağı için fikol yoğunluk gradiyent ayrımı ve immünomanyetik ayırma tekniği (CD45 negatif seçilim) gerçekleştirilmiştir. Sonrasında, zenginleştirilmiş hücreler arasında CTC’leri tespit etmek için, anti-epitelyal hücre adhezyon molekülünün ve sitokeratinlerin ekspresyonuna dayanan çok parametreli akım sitometrisi ile analiz yapılmıştır. Çalışmamız sonucunda akciğer kanserli hastaların tümünde CTC gözlenirken, sağlıklı bireylerde gözlenmemiştir (Z=3.823; p<0.001). Böylece, modifiye ettiğimiz metodun akciğer kanserinde CTC tespitinde kullanılabilirliği gösterilmiştir.
Keywords : Dolaşımdaki tümör hücreleri, akım sitometresi, akciğer kanseri