İN VİTRO SIĞIR EMBRİYOSU ÜRETİM VE TRANSFERİ

Authors : Numan Akyol, Sedat Hamdi Kizil, Tahir Karaşahin

Pages : 1-8

View : 16 | Download : 10

Publication Date : 2007-06-01

Article Type : Research

Abstract :Bu çalışmanın amacı, mezbahadan elde edilen sığır oositlerinden in vitro koşullarda embriyo elde edilmesi ve bunların taşıyıcı ineklere transfer edilerek yavru elde etme imkanlarının araştırılmasıdır. Oositlerin in vitro maturasyonu için, %10 Fötal Buzağı Serumu (FCS) ve 2µg/ml FSH katkılı TCM-199 ile 20-22 saat inkubasyon periyodu, in vitro fertilizasyonu amacıyla Brackett ve Oliphant (BO) mediumu ile direkt yıkama metodu ve 5-6 saat inkubasyon süreci, embriyoların in vitro kültürü amacıyla aminoasitli Charles Rosencrans (CR1aa) mediumu kullanılmıştır. Oositlerin kültür periyotlarında 39 oC, % 5 CO2 ve % 95’in üzerinde nem sağlayan inkubatör kullanılmıştır. 12 mezbaha ziyaretinde 230 ovaryum toplanmış, bunlardan aspirasyon ve dilimleme yoluyla, 1661 iyi kalite (A ve B), 498 C kalite ve dejenere oosit elde edilmiştir. Ovaryum başına; 7.22 iyi kalite, 2.16 C kalite ve dejenere oosit olmak üzere toplam 9.38 oosit elde edilmiştir. Morfolojik kalite sınıflandırmasına göre A ve B kalite olan inek oositleri embriyo elde edilme sürecine alınmıştır. Çalışma sonucunda, % 92.0 maturasyon; % 72.0 bölünme ve % 34.0 morula-blastosiste gelme oranına ulaşılmıştır. Rastgele seçilen oositlerin ölü spermatozoonlarla gerçekleştirilen fertilizasyon işlemlerinin ardından partenogenetik bölünme oranı % 4.5 olarak bulunmuştur. İn vitro embriyoların beş taşıyıcıya taze olarak transfer edilmesini izleyen 50. günde ultrasonla yapılan muayenede iki gebelik tespit edilmiş bunlardan sağlıklı bir buzağı doğumu gerçekleşmiştir. Sonuç olarak, mezbahalardan alınan ovaryumların oosit kaynağı olarak kullanılabileceği, invitro fertilizasyon ve embriyo transferi ile sağlıklı buzağı elde edilebileceği görülmüştür.
Keywords : İn vitro, Embriyo, Maturasyon, Fertilizasyon, Sığır, Transfer