3D CULTURE OF HaCaT KERATINOCYTE CELL LINE AS AN in vitro TOXICITY MODEL

Authors : Selinay Şenkal, Derya Burukçu, Taha Bartu Hayal, Binnur Kiratli, Hatice Burcu Şişli, Derya Sağraç, Burçin Asutay, Engin Sümer, Fikrettin Şahin, Ayşegül Doğan

Pages : 211-220

Doi:10.23902/trkjnat.1158811

View : 16 | Download : 5

Publication Date : 2022-10-15

Article Type : Research

Abstract :Ex vivo dermal toksikoloji analizleri, in vivo test yöntemlerinin yerini alabilmesi için çok önemlidir ve son yıllarda kozmetik, ilaç ve kimyasalların test edilmesi için ilgi çekici hale gelmiştir. Kültürde yapılandırılmış uygun bir epidermis modelinin geliştirilmesi, tek katmanlı kültür sistemlerinin sınırlamalarını ortadan kaldırabilir. Bu amaçla, mevcut çalışmada, keratinosit bazlı toksisite analizi amacı ile bir ex vivo 3D hücre kültürü sistemi geliştirmek için ölümsüzleştirilmiş insan keratinosit hücre hattı (HaCaT) kullandık. Fare embriyonik fibroblast kondisyonel besiyeri ve Matrigel matriksi tabanlı 3D HaCaT hücre kültürü sistemleri, kültürde deri ilgili genleri ve proteinleri ifade etti. 3D HaCaT kültürleri, deri benzeri bir fenotip gösterdi ve seçilen test bileşiklerine karşı tepki gösterdi. 1 saat ve 24 saat boyunca seçilen kimyasallara maruz bırakılan tek katmanlı HaCaT hücrelerine kıyasla güvenilir sonuçlar elde edildi. 3D HaCaT hücre kültürlerinin ve tek tabakalı kültürlerin gen ekspresyon profilleri, test bileşiklerinin uygulanmasından sonra tamamen farklıydı. Özet olarak, sonuçlarımız Matrigel matrisinde oluşturulan bir 3D HaCaT hücre kültürü sisteminin cilt epidermisi benzeri bir fenotip uyguladığını gösterdi. Sonuç olarak, 3D HaCaT hücre kültürleri, in vitro toksikoloji deneylerinin yürütülmesi için kabul edilebilir bir test yöntemi olabilir.
Keywords : skin irritation, epidermis, Reconstructed skin, 3D skin model