Replacement of Fetal Calf Serum With Two Different Synthetic Sera in in Vitro Maturation Medium: Effects On Maturation, Fertilization and Subsequent Development of Cattle Oocytes in Vitro

Authors : Hakan Sağirkaya, Burcu Üstüner

Pages : 51-57

View : 24 | Download : 7

Publication Date : 2010-06-01

Article Type : Other

Abstract :Bu çalışmanın amacı sığır oositlerinin in vitro olgunlaştırılması, fertilizasyonu ve sonraki gelişimleri üzerinde olgunlaştırma medyumunda fötal buzağı serumu (FCS) yerine sentetik serumların (synthetic serum substitute, SSS and serum replacement 1, SR1) kullanılmasının etkilerini incelemektir. Yerel bir mezbahadan elde edilen ovaryumlardan kazanılan seçilmiş oositler 2 mM glutamin, 0,25 mM Na-piruvat, 0,5 g/ml FSH, 5 g/ml LH, 100 U/ml penisilin, 100 µg/ml streptomisin ve %10 FCS, SSS ya da SR1 (sırasıyla FCS, SSS ve SR1 grupları) ile takviye edilmiş doku kültür medyumu (TCM-199) içerisinde 22 saat süreyle olgunlaştırılmıştır. Olgunlaşan oositler dondurulmuş boğa spermiyle in vitro fertilize edilmiştir. Fertilizasyon günü bu çalışmada 0. gün olarak kabul edilmiştir. İn vitro fertilizasyondan 18 saat sonra, fertilize edilmiş oositler in vitro kültür için sentetik ovidukt sıvısı (SOF) kültür medyumuna transfer edilmiştir. İki hücre, 8-hücre, morula ve blastosist sayıları kaydedilmiştir. FCS, SSS ve SR1 grupları için sırasıyla toplam 238, 243 ve 200 oosit kullanılmıştır. FCS, SSS ve SR1 gruplarında sırasıyla, 179 (%75,21), 177 (%72,84) ve 80 (%40,00); 121 (%50,84), 114 (%46,91) ve 38 (%19,00); 97 (%40,76), 98 (%40,03) ve 21 (%10,50); ve 71 (%29,83), 69 (%28,40) ve 10 (%5,00) oosit 2-hücre, 8-hücre, morula ve blastocyst aşamalarına gelişmiştir. SR1 grubunun kaydedilen tüm gelişim aşamalarındaki gelişim oranları FCS ve SSS gruplarının kaydedilen tüm gelişim oranlarından önemli düzeyde düşük bulunmuştur. FCS ve SSS grupları arasında gelişim oranları bakımından gelişim aşamalarının hiçbirinde fark bulunmamıştır. Sonuç olarak, SSS sığır oositlerinin in vitro maturasyonunda FCS’nin yerine kullanılabilen bir alternatifken, SR1 maturasyon medyumunda FCS’nin yerine kullanılabilecek iyi bir alternatif değildir
Keywords : İn vitro olgunlaştırma, sığır, oosit, FCS, SSS, SR1, embriyo