Obezite Araştırmaları İçin İn Vitro Adiposit Hücre Kültürü İle Etkili Model Oluşturma: Ön Çalışma

Authors : Ezgi Nur Çil, Yasemin Soysal

Pages : 59-64

Doi:10.25048/tudod.1418459

View : 60 | Download : 92

Publication Date : 2024-04-29

Article Type : Research

Abstract :Amaç: 3T3-L1 preadipositlerin farklılaşma etkinliği obezite, diyabet ve ilgili bozukluklarla ilişkili hücresel mekanizmalar üzerine yapılan çalışmaları etkileyen önemli bir faktördür. 3T3-L1 hücrelerinin farklılaşması genellikle insülin, deksametazon (DEX) ve 3-izobütil- 1-metilksantin (IBMX) içeren bir adipojenik kokteyl ile indüklenmektedir. 3T3-L1 hücreleri çoğaltılırken dikkat edilmesi gereken önemli noktalar içeren bir sürece sahip hassas bir hücre grubu olup ilerleyen pasajlarda farklılaşma yeteneğini kaybedebilmektedir. Bu sorunu çözmek için, çalışmamızın amacı doğrultusunda, yaygın olarak kullanılan üç farklı adipojenik kokteylin farklılaşma verimliliği karşılaştırılmıştır. Bununla birlikte, birtakım parametreler değiştirilerek 3T3-L1 hücrelerinin farklılaşma yetenekleri test edilmiştir. Gereç ve Yöntemler: Çalışmamızda 3T3-L1 hücre kültürü, fibroblast hücrelerin olgun adiposit hücrelere farklılaştırılması, Oil Red O boyama ile lipitlerin mikroskop altında gösterilmesi ve kantitatif analiz için boyanın spektrofotometrik ölçümü yöntemleri kullanılmıştır. Bulgular: Deney sonuçları, 0,5 mM IBMX, 0,25 μM DEX ve 1 μg/mL insülin içeren adipogenik kokteylin 3T3-L1 hücre farklılaşması için en etkili kokteyl olduğunu (p<0,0001) ve farklılaşmanın etkinliğinin adipojenik ajanların konsantrasyonları ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir. Sonuç: Çalışmamızda ATCC’nin 3T3-L1 hücreleri için vermiş olduğu protokolün alternatifi olarak in vitro preklinik obezite modeli için kullanılabilecek önemli modifikasyonlar bildirilmiştir.
Keywords : Obezite, hücre kültürü, 3T3-L1, adipogenez, adiposit