HT22 Fare Hipokampal Hücre Hattının Nöronal Farklanma Besiyerine Verdiği Apoptotik Tepkinin Ölçülmesi

Authors : Ayla Batu Öztürk, Derya Yetkin, Nail Can Öztürk

Pages : 375-383

Doi:10.31832/smj.1264019

View : 24 | Download : 43

Publication Date : 2023-09-30

Article Type : Research

Abstract :Amaç: Bu çalışmanın amacı nörobiyoloji çalışmalarında sıkça kullanılmakta olan HT22 fare hipokampal hücre hattının nöronal farklılaşma modeli olarak kullanılabilirliğinin anlaşılması için standart bir farklandırma besiyerine farklı sürelerde verdiği apoptotik cevabın sınanmasıdır. Gereç ve Yöntemler: HT22 hücrelerinin ekilmesi ve farklandırma dışında kültüre edilmesi için HG-DMEM farklandırma için ise B27+ katkılı NB+ medyumu kullanılmıştır. Kontrol grubu da dâhil olmak üzere toplam 9 farklı grup standart olarak kültüre edilmiştir. Deney sonunda AnnexinV/PI işaretlemesiyle erken/geç apoptozis ve nekrozis oranları akım sitometrik olarak belirlenmiştir. Verilerin normal dağılıma uyup uymadığı Shapiro-Wilks testi ile sınandıktan sonra en uygun testle istatistiksel analiz gerçekleştirilmiştir. Bulgular: Gruplar arasındaki karşılaştırmada erken apoptozis (P 0,05). Sonuç: Nörodejeneratif hastalıklara ait önemli patobiyolojik özelliklerin in-vitro düzeyde modellenmesinde sıkça kullanılan, fakat nöronal farklılaşma açısından uygunluğu yeterince bilinmeyen HT22 hippokampal hücre hattının, yaygın olarak kullanılan bir farklandırma besiyerine erken apoptozis (kültürleme süresine bağlı) ve geç apoptozis (süreden bağımsız) artışı şeklinde anlamlı tepkiler oluşturduğu anlaşılmıştır. Bulgularımız HT22 hücre hattının farklılaşma çalışmalarında kullanılabilirliği açısından apoptozis düzeyinde önemli ipuçları sunmaktadır.
Keywords : HT22, hipokampus, nöronal farklanma, apoptozis, akım sitometri