- Mersin Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi
- Vol: 12 Issue: 2
- Mitoz sırasında H2O2 ile indüklenen oksidatif strese karşı dirençte Yca1’in rolünün incelenmesi...
Mitoz sırasında H2O2 ile indüklenen oksidatif strese karşı dirençte Yca1’in rolünün incelenmesi
Authors : Pınar Buket Atalay, Nur Kaluç
Pages : 230-239
Doi:10.26559/mersinsbd.517361
View : 8 | Download : 2
Publication Date : 2019-08-30
Article Type : Research
Abstract :Amaç: Günümüzde başarıyla kullanılan antikanser ilaçlar antitümör etkilerini mikrotübüllerin yapısını bozup hücrelerde uzun süreli mitotik arreste yol açarak gösterirler. Uzun süreli mitotik arrestin sonuçlarından biri apoptozdur. Metakaspazlar, metazoan haricindeki canlılarda bulunan ve apoptozda önemli rol oynadıkları bilinen yapısal olarak kaspaz homologlarıdır. Bu çalışmada, Saccharomyces cerevisiae ’de mikrotübülleri hedef alan antikanser ilaçlarla indüklenen mitotik arrestin oksidatif stres direncine etkisinin ve mayadaki tek metakaspaz olan Yca1’in bu etkideki olası rolünün araştırılması amaçlanmıştır. Yöntem: Bu amaç için, yabanıl tip (YT) ve Yca1 delesyon mutant ( yca1 Δ ) suşlarında mitotik arrest nocodazole veya carbendazim ile ; G1-arrest ise alfa faktör ile tetiklenmiştir. Her iki suştaki protein agregat oluşumu ise cycloheximide muamelesi ile engellenmiştir. Bu koşullardan her biri altında 6 mM H 2 O 2 ile indüklenen oksidatif stresin YT ve yca1 Δ suşlardaki sağkalım üzerine etkisi koloni oluşturan birim (cfu) ve nokta ekim yöntemleriyle; reaktif oksijen türleri (ROT) birikimi üzerine etkisi ise H 2 DCFDA yöntemiyle incelenerek karşılaştırılmıştır. Bulgular: Nocodazole veya carbendazim ile tetiklenen mitotik arrest YT S.cerevisiae hücrelerinde oksidatif stres direnci oluştururken, aynı koşullardaki yca1 Δ suşunda ise direnç oluşturmadığı tespit edilmiştir. Diğer yandan, alfa faktörle tetiklenen G1-arrestin YT veya yca1 Δ suşlarında oksidatif stres hassasiyeti üzerinde önemli bir etkisi olmadığı gözlenmiştir. Ayrıca, cycloheximide muamalesi ile protein agregat oluşumunun engellenmesinin yca1 Δ suşunda YT suşa benzer şekilde mitotik arrest sonucu oksidatif stres direnci oluşmasına yol açtığı görülmüştür. Sonuç: Mikrotübülleri hedef alan antikanser ilaçlarla tetiklenen mitotik arrest YT S.cerevisiae hücrelerinde oksidatif stres direncine yol açar. Sadece mitozda gelişen bu dirençte Yca1’in protein agregat oluşumunu engelleme fonksiyonu önemli rol oynamaktadır.Keywords : Oksidatif stres direnci, Mitotik arrest, Yca1, Saccharomyces cerevisiae