- KSÜ Doğa Bilimleri Dergisi
- Vol: 23 Issue: 5
- Trichophyton sp. Suşundan Keratinaz Üretimi, Saflaştırılması ve Kısmi Karakterizasyonu
Trichophyton sp. Suşundan Keratinaz Üretimi, Saflaştırılması ve Kısmi Karakterizasyonu
Authors : Dönay Parlak, Hüseyin Taniş, Ashabil Aygan
Pages : 1135-1143
Doi:10.18016/ksutarimdoga.vi.678756
View : 19 | Download : 2
Publication Date : 2020-10-31
Article Type : Research
Abstract :Keratinaz aktivitesi gösteren Trichophyton sp. Tr-9 suşu keratin tozu- feather meal içeren minimal besiyerinde büyütürek enzim üretimi gerçekleştirilmiştir. Süpernatanttan Amonyum sülfat çöktürme sonrası, Sephadeks G-100 ve DEAE Sepharose kolon kromatografi uygulamaları ile enzim saflaştırılması yapılmıştır. Maksimum keratinolitik aktivite pH 7.5 ve 37°C’de gözlenmiştir. Enzim pH 5.5-8.0 ve 20°C-40°C sıcaklık aralıklarında stabilite gösterirken, enziminin moleküler ağırlığı SDS page ve zimogram analizlerinde yaklaşık 34 kDa olarak hesaplandı. CaCI2 (5mM) keratinaz aktivitesini (%148) stimüle edici etki gösterdi. Diğer taraftan EDTA (5mM) ve SDS (%1) sırasıyla %49, % 49 etki göstererek kısmen inhibe etti, PMSF (1mM ve 5mM) ile tam inaktivasyon elde edildi. Sonuç olarak, enzimin fiziko-kimyasal özellikleri birçok endüstriyel ve biyoteknolojik uygulamalarda kullanışlı olabileceğini göstermiştir.Keywords : Trichophyton sp., Keratinaz, Saflaştırma, Karakterizasyon