- Karadeniz Fen Bilimleri Dergisi
- Vol: 8 Issue: 1
- Papatyadan (Matricaria chamomilla L.) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Çeşitli Taşıyıcılara İmmobi...
Papatyadan (Matricaria chamomilla L.) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Çeşitli Taşıyıcılara İmmobilize Edilmesi
Authors : Bahar Bilgin Sökmen, Burçak Sari, Tuğba Azap
Pages : 131-143
Doi:10.31466/kfbd.396563
View : 14 | Download : 2
Publication Date : 2018-06-18
Article Type : Research
Abstract :Bu çalışmada, Giresun İli ve çevresinde bol miktarda yetişen papatyadan ( Matricaria chamomilla L . ) lipaz enzimi ilk defa saflaştırıldı ve kinetik özellikleri incelendi. Lipaz esteraz aktivitesi gösteren homojenizatın % 70’lik (NH 4 ) 2 SO 4 kesiti elde edildi. Dializden sonra bu kesit DEAE-selüloz kolonlara uygulanarak lipaz enzimi 26 kat saflaştırıldı. Saflaştırma işlemlerinde protein miktarı Lowry ve E 280 /E 260 Warburg yöntemlerine göre, lipaz esteraz aktivitesi ise Erlanson yöntemine göre tayin edildi. SDS-PAGE elektroforezi ile elde edilen saflaştırılmış enzimin molekül ağırlığının 30 kDa olduğu bulundu. Optimum pH ve sıcaklık değerleri belirlendi. Papatyadan saflaştırılan lipazın optimum pH’sının 9, optimum sıcaklığının 50 °C olduğu bulundu. Enzimin çeşitli substratlara karşı ilgisi incelendiğinde, lipazın ilgisinin en çok p-nitrofenil palmitatta olduğu ve bu substrata karşı K m ve V max değerlerinin sırasıyla 0,2899 mM ve 144,93 Ünite olduğu saptandı.Ayrıca , papatyadan saflaştırılan lipaz enzimi çeşitli taşıyıcılar üzerine adsorpsiyon, kovalent ve iyonik bağlama yöntemleri ile immobilize edildi. İmmobilize edilmiş papatya lipazının optimum pH, optimum sıcaklık gibi kinetik özellikleri de incelendi.Keywords : Papatya (Matricaria chamomilla L.), Lipaz, Saflaştırma, İmmobilizasyon