- İstanbul Üniversitesi Eczacılık Fakültesi Dergisi
- Vol: 33
- PARTIAL PURIFICATION and CHARACTERIZATION of ASPARTATE AMINOTRANSFERASE from the HEPATOPANCREAS of t...
PARTIAL PURIFICATION and CHARACTERIZATION of ASPARTATE AMINOTRANSFERASE from the HEPATOPANCREAS of the MUSSEL Mytilus galloprovincialis Lam.
Authors : A. Can, N. Akev A. Askhasi
Pages : 37-48
View : 12 | Download : 6
Publication Date : 2015-09-08
Article Type : Research
Abstract :Bu qaligmada, Turkiye sahillerinde bulunan Mytilus gallopi.ovincialis Lam. midye tiirunun aspartat ve alanin aminotransferazlarl incelendi. Tum doku, hepatopankreas ve manto k~simlannda yapllan aragt~rmada, aspartat aminotransferazln hepatopankreastaki aktivitesinin alanin aminotransferaza gore fazla olmasindan dolayl, midye hepatopankreas~ndan aspartat aminotransferaz kismen saflagtlrildi ve bazl kinetik ozellikleri incelendi. Deneyin yapilacagl gun 1stanbul Bogazi Rumelikava@i klyilarindan toplanan midyelerin hepatopankreas k~s~rnlarl qlkanlarak, %0.9 NaCl ile, homojenize edildi. Aspartat aminotransferaz aktivitesi gosteren homojenizatin %35-%65 amonyum sulfat kesiti hidroksilapatit kolona uygulandi. pH's1 6.8 olan ve artan molaritede fosfat tamponu ile yapllan basamaklt elusyon sonucunda, aspartat aminotransferaz 100 mM fosfat tarnponu ile eliie edildi. Bu iglem sonunda, midye hepatopankreaslndan 83 kez safla~tlnlan aspartat aminotransferazln poliakrilamid jel elektroforezinde iki aktivite bandl gostermesi nedeniyle iki izoenzim iqerdiii sonucuna vanldl. Aspartat aminotransferaz iizerine temperaturun etkisi incelendiginde, enzimin 25 "C ve 40 "C'lerde maksimum aktivite gosterdigi ve aktivitenin 60 "C'de tamamen kayboldugu goriildu. Enzimin optimum pH'slnin pH 7.6'da oldugu; aspartat ve 2- oksoglutarata kargi Km degerlerinin slraslyla, 1.7 mM ve 6.6~10-~ mM, aynl substratlara kary Vmax degerlerinin ise 0.162 U/ml ve 0.149 U/ml oldugu bulundu.Keywords : Mussel, Mytil~~s galloproviizcialis Lam., aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, transaminase