- Harran Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi
- Vol: 4 Issue: 2
- Brusellozis Şüpheli Sürülerdeki İneklerden Alınan Klinik Örneklerden Brucella spp. Tanısı İçin PCR v...
Brusellozis Şüpheli Sürülerdeki İneklerden Alınan Klinik Örneklerden Brucella spp. Tanısı İçin PCR ve Bakteriyolojik Kültür Yöntemlerinin Karşılaştırılması
Authors : Sevil Erdenliğ Gürbilek, Osman Yaşar Tel, Oktay Keskin
Pages : 48-52
View : 12 | Download : 5
Publication Date : 2015-06-01
Article Type : Other
Abstract :Bu çalışmada, Şanlıurfa İlinde brusella infeksiyonu olduğu düşünülen sürülerdeki ineklerden alınan 68 adet kan (akyuvar kısmı), serum, süt ve vajinal sıvap örneklerinden Brucella etkenlerinin tanısı için bakteriyolojik kültür ve PZR yöntemlerinin karşılaştırılması hedeflendi. Serum örneklerinin Rose Bengal Pleyt Test (RBPT) antijeni ile aglütinasyon testinde 35 örnek (% 51,4) ve süt örneklerinin Süt Ring Testi (SRT) ile analizinde ise 39 süt örneği pozitif bulundu (% 57,4). Süt örneklerinden 15 (% 22) adet Brucella spp. izolasyonu gerçekleşti. Tüm izolatlar B. abortus biyotip 3 olarak identifiye edildi. Akyuvar kısmından ve vaginal sıvaplardan Brucella spp. izolasyonu yapılamadı. Klinik örneklerin tümünün DNA ekstraksiyonlarının ardından yapılan cins spesifik PZR sonucu, süt örneklerinin 11’inden (% 16,2) ve akyuvar örneklerinin 6’sından (% 8,8) 223 bp’lik DNA amplifikasyonu saptanırken, vaginal sıvapların hiçbirinden DNA amplifikasyonu gerçekleştirilemedi. Serolojik olarak negatif inekler kültürel ve moleküler yönden negatif bulundu. İzole edilen Brucella kültürlerine yapılan Bruce ladder multipleks PZR sonucu 15 izolatın tümü B.abortus profili gösterdi. Bakteriyel kültür altın standart olarak alınarak, süt örneği için PZR duyarlılığı % 78,9 ve özgüllüğü % 100 olarak belirlendi. Sonuç olarak, kan ve vaginal sıvaplardan bakteriyel izolasyonun yapılamaması ve PZR duyarlılığının bu örneklerde düşük olmasının nedeninin, hastalığın doğası gereği etkenin aralıklı olarak süt ve vajinal akıntılar ile atılmasına ve kanda bakteri yükünün hastalığın evrelerine göre değişebilmesine bağlı olduğu düşünülmüştür. Bu nedenle gerek kültür ve gerekse DNA amplifikasyonu için kan, süt ve vajinal sıvap örneklerinin etkeni atık materyallere göre daha az taşıyabileceğinin akılda tutulmasının ve hastalığın kesin tanısı için bakteriyel serolojik ve moleküler tanı yöntemlerinin kombine olarak kullanılmasının önemli olduğu sonucuna varılmıştırKeywords : Brucella abortus, PZR, süt, Brucella spp. izolasyonu, teşhis