- Experimed
- Vol: 7 Issue: 13
- Kronik Myeloid Lösemide BCR-ABL Füzyon Transkriptinin Eş Zamanlı PCR ile Kantitasyonu İçin Referans ...
Kronik Myeloid Lösemide BCR-ABL Füzyon Transkriptinin Eş Zamanlı PCR ile Kantitasyonu İçin Referans Plazmid Oluşturulması
Authors : Yuk Yin Ng, Zeynep Hazal Yılmaz, Özden Hatırnaz Ng, Müge Sayitoğlu
Pages : 93-100
View : 12 | Download : 3
Publication Date : 2017-06-01
Article Type : Research
Abstract :Kronik Myeloid Lösemi (KML), granülositlerin hızla artan proliferasyonuyla seyreden bir myeloprolifertif hastalıktır. KML, 9 ve 22 kromozomları arasındaki bir translokasyonla oluşan Philadelphia kromozomunun varlığı ile karakterizedir ve bu translokasyon sonucunda BCR (22. kr) ve ABL (9. kr) arasında bir füzyon gen meydana gelir. BCR ve ABL genlerindeki kırık bölgelerine bağlı olarak farklı BCR-ABL füzyon transkriptleri oluşmaktadır. En bilinenleri p190, p210 ve p230 füzyon transkriptleridir. BCR-ABL füzyon transkript miktarı tümör yükü ile doğrudan ilişkili olduğu için hasta örneklerinde BCRABL anlatımını sayısal miktar olarak belirlemek önemlidir. Daha önce p210 transkripti için bir referans plazmid oluşturulmuştur ve bu plazmidin seri dilüsyonları ile elde edilen standart eğrisi ile sayısal miktar tayini yapılmaktadır. Ancak maalesef benzer bir plazmid p190 ve p230 kırıkları için mevcut değildir. Bu çalışmada hem p190 hem de p230 transkriptlerinin miktar tayinini yapabilecek bir referans plazmid oluşturmayı amaçladık. Ancak p190 plazmidi bütün uğraşlarımıza rağmen başarıya ulaşamadı, elde ettiğimiz kolonilerin hiç biri p190’ın 1000bç’lik fragmanını içermiyordu. Bunun aksine p230 referans plazmidi (pBL-230) 620bç’lik p230 fragmanı ile klonlanabildi. pBL-230’un seri dilüsyonları ile iki farklı UPL prob kullanarak KML hastalarında p230 transkript miktarını tayin edebildik.Keywords : Kronik Myeloid Lösemi (KML)