- Trakya University Journal of Natural Sciences
- Vol: 23 Issue: 1
- In vitro AND in silico EVALUATION OF THYMOQUINONE AS POTENTIAL ANTICANCER AGENT IN HUMAN ACUTE MYELO...
In vitro AND in silico EVALUATION OF THYMOQUINONE AS POTENTIAL ANTICANCER AGENT IN HUMAN ACUTE MYELOID LEUKEMIA HL-60 CELLS
Authors : Neslihan Tekin Karacaer
Pages : 53-63
Doi:10.23902/trkjnat.999403
View : 10 | Download : 4
Publication Date : 2022-04-15
Article Type : Research
Abstract :Bu çalışmada, insan akut miyeloid lösemisinde timokinonun sitotoksik, apoptotik ve otofajik etkilerinin araştırılması amaçlandı. Timokinonun sitotoksik etkileri 3-(4,5-dimetiltiyazol2-yl)-2,5-difeniltetrazolyum-bromür (MTT) testi ile belirlendi. B hücre lenfoma 2 ile ilişkili X proteini (Bax), B hücre lenfoma 2 (Bcl-2), kaspaz 3, rapamisinin memeli hedefi (mTOR), fosfatidilinositol-3-kinaz (PI3K) ve protein kinaz B (AKT) gen ekspresyon analizleri kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (qRT-PCR) ile yapıldı. Bax, Bcl-2, kaspaz 3, mTOR, AKT ve PI3K proteinlerinin aktif bölgesindeki timokinonun potansiyel bağlanmasını araştırmak için AutoDock Tools 4.2 yazılımı kullanıldı. Timokinon, HL-60 hücrelerinde (İnsan lösemi hücre hattı) 16.35 µM değerinde sitotoksik etkiye neden olmuştur. Uygulanan tüm dozlarda kontrole göre Bcl-2 ekspresyonu azalmıştır. 10 µM, 15 µM ve 25 µM timokinon ile tedavi edilen hücrelerde kontrole göre kaspaz 3 ekspresyon seviyesinde bir azalma tespit edildi. Timokinon, tüm dozlarda kontrole kıyasla mTOR ve PI3K ifadelerinde önemli bir azalmaya neden olurken, AKT 15 µM'lik bir dozda azaldı. Yerleştirme sonuçları, timokinonun apoptotik ve otofajik proteinlerin aktif bölge amino asitleri ile hidrofobik etkileşimler ve hidrojen bağı yoluyla etkileşime girdiğini belirtti. Bulgularımız, timokinonun HL-60 hücrelerinde PI3K/AKT/mTOR yolunu önleyerek otofajiyi uyarabildiğini ve akut miyeloid lösemi tedavisi için yeni bir hedef olabileceğini düşündürmektedir.Keywords : AML, Apoptosis, Autophagy, Molecular docking, PI3K/AKT/mTOR, Thymoquinone