- Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences
- Vol: 7 Issue: 1
- The Difference Between The Response To Glutamate Excitotoxicity and The Role Of Ca2+ Channel Blocker...
The Difference Between The Response To Glutamate Excitotoxicity and The Role Of Ca2+ Channel Blockers in Cortical Neuron and SH-SY5Y Cells Cultures
Authors : Betül ÇİÇEK, Ali TAGHİZADEHGHALEHJOUGHİ, Ahmet HACIMÜFTÜOĞLU, Aysegul YILMAZ
Pages : 45-52
Doi:10.35229/jaes.1003400
View : 7 | Download : 2
Publication Date : 2022-03-31
Article Type : Research
Abstract :Kortikal nöron ve SH-SY5Y hücreleri glutamat eksitotoksisite çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır, ancak hangisinin bu modeli daha iyi yansıttığı belirsizdir. Genel olarak glutamat, L ve L/N-Ca2+ kanallarının aktivasyonuna ve öldürücü Ca2+ akışı yoluyla hücre ölümüne yol açarak toksisite koşullarını indükler. Bu hipotezi değerlendirmek için eksitotoksik koşullar altında L ve L/N-Ca2+ kanal blokerleri, lasidipin ve amlodipinin etkileri değerlendirildi. Aynı zamanda bu çalışmada bu iki hücre hattının bu modeli daha iyi yansıttığını belirlemeyi amaçladık. Eksitotoksisiteyi indüklemek için kortikal nöron ve SH-SY5Y hücreleri glutamat 10-5 mM mM ile inkübe edildi. Glutamat ile 30 dakikalık inkübasyondan sonra, bu hücrelere farklı konsantrasyonlar (1, 2 ve 4 µg lasidipin ve 20, 50 ve 100 μM amlodipin) uygulandı.Lasidipin ve amlodipinin olası nöroprotektif rolleri, hücre canlılığı, oksidatif stres ve apoptotik değişiklikler yoluyla araştırıldı. Sonuçlarımız SH-SY5Y hücrelerinin oksidatif stres aracılı glutamat toksisitesini daha iyi yansıttığını gösterdi. 4 µg lasidipin ve 100 μM amlodipin bu hücrelerde önemli nöroprotektif rollere sahip olmasına rağmen en yüksek koruyucu etki 100 μM amlodipin'de SH-SY5Y hücrelerinde de belirlendi. En yüksek canlılık oranı, 100 μM amlodipin ile tedavi edilen SH-SY5Y hücrelerinde %88,8 olarak bulundu.TAC, TOS, LDH tahlilleri ve flow sitometrik analizinden elde edilen sonuçlar MTT sonuçlarımızla benzerdi. Tüm sonuçlar birlikte değerlendirildiğinde SH-SY5Y hücrelerinin glutamat kaynaklı eksitotoksisiteyi yansıtmada daha etkili hücre hattı olduğunu ve 100 μM amlodipinin bu toksisitenin tedavisinde daha koruyucu bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir.Keywords : kortikal nöron, SH-SY5Y, glutamat eksitotoksisitesi, Ca2+, lacidipin, amlodipin