- Journal of Anatolian Environmental and Animal Sciences
- Vol: 3 Issue: 3
- Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncel...
Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi
Authors : Bahar Bilgin Sökmen, Rıdvan Ilgün
Pages : 101-106
Doi:10.35229/jaes.416800
View : 14 | Download : 6
Publication Date : 2018-12-18
Article Type : Research
Abstract :Bu çalışmada, ülkemizde Giresun İli ve çevresinde bol miktarda yetişen kestane (Castanea Sativa) tohumlarından lipaz enzimi ilk defa saflaştırıldı ve kinetik özellikleri incelendi. Petrol eteri ile yağı uzaklaştırılmış kestane tohumları 0,06 M sodyum fosfat tamponu (pH=7,0) ile homojenize edildi. Lipaz esteraz aktivitesi gösteren homojenizatın % 90’lık (NH4)2SO4 kesiti elde edildi. Dializden sonra bu kesit sırasıyla hidroksilapatit ve DEAE-selüloz kolonlara uygulanarak lipaz enzimi 186,87 kez saflaştırıldı. SDS-PAGE elektroforezi sonucunda saflaştırılan enzimin molekül ağırlığının 30 kDa olduğu bulundu. Kestane tohumlarından saflaştırılan lipazın optimum pH’sının 9,0; optimum sıcaklığının 30 °C olduğu bulundu. Enzimin çeşitli substratlara karşı ilgisi incelendiğinde, lipazın ilgisinin en çok p-NFM’a olduğu ve Km ve Vmax değerlerinin sırasıyla 1,017 mM ve 163,874 U olduğu saptandı.Keywords : Kestane (Castanea sativa) tohumu, lipaz, karakterizasyon, saflaştırma