- Hacettepe Journal of Biology and Chemistry
- Vol: 39 Issue: 4
- Purification of Glutathione S-Transferase Enzyme from Rainbow Trout Erythrocytes and Examination of ...
Purification of Glutathione S-Transferase Enzyme from Rainbow Trout Erythrocytes and Examination of the Effects of Certain Antibiotics on Enzyme Activity
Authors : Veysel Çomakli, Mehmet Çiftci, Ömer Irfan Küfrevioğlu
Pages : 413-419
View : 10 | Download : 3
Publication Date : 2011-12-01
Article Type : Other
Abstract :B u çalışmada bazı antibiyotiklerin gökkuşağı alabalık eritrositlerinden elde edilen glutatyon-S-transferaz EC 2.5.1.18 enzim aktivitesi üzerine etkileri araştırıldı. Bu amaçla eritrosit glutatyon S- transferaz enzimi glutatyon–agaroz afinite kromatografisi tekniği ile %90 verimle 8714 kat saflaştırıldı. Saflaştırma esnasında sıcaklık kontrol altında tutuldu +4oC . Enzim saflığı SDS-PAGE yapılarak kontrol edildi. Yaklaşık olarak 23 kDa’da tek bant elde edildi. GST enzim aktivitesi, 1-kloro-2,4-dinitrobenzenglutatyon CDNB-GSH konjugatının oluşumunun spektroskopik olarak izlenmesi ile belirlendi. Kinetik çalışmaların tamamında bu metot kullanıldı. Ayrıca enzim aktivitesi üzerine gentamisin, amikasin, sefuroksim sodyum, ampisilin, ornidazol ve metranidazol gibi antibiyotiklerin inhibisyon etkileri incelenerek yüksek inhibisyon etkisi gösteren gentamisin, amikasin, sefuroksim sodyum ilaçlarının IC değerleri ve Ki sabitleri hesaplanarak inhibisyon tipleri belirlendiKeywords : Glutatyon-S-transferaz EC 2.5.1.18, gökkuşağı alabalık eritrositleri, antibiyotikler