- Uluslararası Mühendislik Araştırma ve Geliştirme Dergisi
- Vol: 14 Issue: 1
- Lazer Ablasyonu ile Sentezlenmiş Levan Kaplı Altın Nanoparçacıkların siRNA Transfeksiyon Ajanı Olma ...
Lazer Ablasyonu ile Sentezlenmiş Levan Kaplı Altın Nanoparçacıkların siRNA Transfeksiyon Ajanı Olma Potansiyeli Üstüne Çalışma
Authors : Ömer Aktürk, Beste Çağdaş Tunali
Pages : 282-298
Doi:10.29137/umagd.943584
View : 13 | Download : 4
Publication Date : 2022-01-31
Article Type : Research
Abstract :Bu çalışmada, altın nanoparçacık (AuNP) temelli kısa interferanslı RNA (siRNA) transfeksiyon vektörü tasarlanmıştır. Sıvı içinde atımlı lazer ablasyon yöntemiyle (PLAL) levan polisakkariti içeren ortamda sentezlenen AuNP’ler (Levan-AuNP), karakterizasyon testlerinin ardından MCF-7 meme kanseri hücrelerinde siRNA transfeksiyon çalışmalarında kullanılmıştır. Hedefsiz siRNA sekansı ile gerçekleşen %48’lik Levan-AuNP-siRNA etkileşimi A260 absorbans ölçümleriyle bulunmuştur. Farklı derişimlerde Levan-AuNP ve 50 nM siGLO Green transfeksiyon indikatörü hazırlanarak MCF-7 hücrelerindeki optimum siRNA transfeksiyon koşulları belirlenmiştir. Transfeksiyon çalışmalarında öncelikle üçlü floresan boyama (siGLO Green, propidyum iyodür (PI) ve Hoechst 33342) yapılmış ve sitotoksisite görülmemiştir. Özellikle en yüksek derişimdeki Levan-AuNP grubunda ilk günde transfeksiyon gerçekleşirken, tek başına siGLO Green grubunda transfeksiyon gerçekleşmemiştir. 2 ve 4 günlük inkübasyonda ise tüm gruplarda transfeksiyon gözlemlenmiştir. PI ve Hoechst kullanılmadan yapılan ikinci transfeksiyon çalışmalarında ise siGLO Green floresan şiddetinin belirgin şekilde arttığı ve özellikle Levan-AuNP-siGLO Green komplekslerinde daha kuvvetli ve noktalı bir floresan ışıma görülmüştür. Ortalama floresan şiddetleri ölçümlerine göre, tüm Levan-AuNP gruplarında istatistiksel açıdan anlamlı ölçüde artış bulunmuştur. Sonuç olarak, bu çalışmada geliştirilen Levan-AuNP’nin, mevcut transfeksiyon ajanlarına alternatif olabileceği gösterilmiştir.Keywords : Levan, altın nanoparçacık, lazer, siRNA, transfeksiyon