- Uludağ Üniversitesi Tıp Fakültesi Dergisi
- Vol: 28 Issue: 2
- Reseptör İmmünohistokimyasında Mikrodalga Işınımlı "Antijen Retrieval" Yönteminin Kullanım...
Reseptör İmmünohistokimyasında Mikrodalga Işınımlı "Antijen Retrieval" Yönteminin Kullanımı
Authors : F. Zehra Minbay, Özhan Eyigör, Ilkin Çavuşoğlu, Zeynep Kahveci
Pages : 21-26
View : 12 | Download : 5
Publication Date : 2002-06-01
Article Type : Research
Abstract :Reseptör immünohistokimyasında önemli problemlerden biri olan antijen miktarının azlığı veya maskelenmesi sorununun giderilmesi amacıyla, doku ya da kesitlere; antijen retrieval (AR) yöntemleri uygulanmaktadır. Çalışmamızda, pek çok antijen için başarılı sonuçlar verdiği bilinen mikrodalga ışınımlı AR (MW–AR) yönteminin kainat reseptör altünitesi GluR5'e özgün antikor (anti-GluR5) için gerekli olup olmadığı, gerekli ise hangi AR solüsyonunun uygun olabileceği araştırıldı. Bu amaçla, perfüzyon yoluyla fikse edilen sıçan beyin dokusundan 50 μm kalınlığında vibratom kesitleri alındı. Kesitlere, taze hazırlanmış iki farklı solusyonda (50 mM trisodyum sitrat solüsyonu, pH 4.5 ve 6.0 ya da 10 mM EDTA solüsyonu, pH 8.0) MW–AR işlemini izleyen, yüzen kesit immünohistokimyası uygulandı. Işık mikroskobik incelemelerde, 50 mM trisodyum sitrat solüsyonu (pH 6.0) ile AR uygulanan kesitlerde özgün immün işaretlemenin olduğu ve bu kesitlerde zemin boyanmasının olmadığı gözlendi. Sonuç olarak, kullanılan antikor için AR'ın gerektiği ve özgün bir immün reaksiyon için AR solüsyonunun pH'nın ve erişilen son sıcaklığının önemli olduğu belirlendi.Keywords : Mikrodalga ışınımı, Antijen retrieval, İmmünohistokimya