- Süleyman Demirel Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi
- Vol: 16 Issue: 3
- Hindiba (Cichorium intybus L.) Bitkisinden Myrosinaz Enziminin Saflaştırılması, Karakterize Edilmesi...
Hindiba (Cichorium intybus L.) Bitkisinden Myrosinaz Enziminin Saflaştırılması, Karakterize Edilmesi ve Kozmetik Alanında Kullanılabilirliğinin İncelenmesi
Authors : Nazan Demir, Esen Taşgin
Pages : 307-314
Doi:10.19113/sdufbed.69338
View : 9 | Download : 5
Publication Date : 2014-07-13
Article Type : Other
Abstract :Myrosinaz glukosinolatların hidrolizinden sorumlu bir enzimdir (E.C: 3.2.3.2 β-thioglucosidase, β-thioglucoside glucohydrolase olarak da bilinir). Kanserle mücadele için umut verici bileşikler olarak kabul edilen sinigrin, glukoraphanin (GRA) ve glukoraphenin (GRE) gibi ara yıkım ürünlerinden dolayı bazı alifatik glukosinolatlar oldukça ilgi çekmiş ve myrosinaz enziminin bu tümör küçültücü etkisi son yıllarda önem kazanmıştır. Bu çalışmada, myrosinaz amonyum sülfat çöktürmesi, Q-sepharose, Konkanavalin A sepharose afinite kromatografisi ile Hindiba'dan (Cichorium intybus'un L.) homojen olarak saflaştırıldı. Saflaştırılan protein SDS- poliakrilamid jel elektroforezinde 35 kDa ağırlığında tek bir bant olarak gözlenmiştir. Enzim pH 8,0'de ve 70 °C' de maksimum aktivite göstermiştir. Saflaştırılmış enzim 1 yıldan fazla süreyle 4° C de sabit kalmıştır. Substrat olarak sinigrin kullanılarak, saflaştırılmış enzim için KM ve Vmax değerleri sırasıyla 0,02 ve 0,074 μmol glukoz. min–1.mg–1 olarak belirlenmiştir. Enzim askorbik asit (AA), EDTA, SDS ve β-merkaptoethanol tarafından güçlü bir şekilde aktive edilmiştir. Buna ek olarak, bazı iyonların myrosinaz enzim aktivitesi üzerine 10, 1 ve 0,1 mM'lık konsantrasyonlardaki etkileri (Cu2+, Ni2+, Ca2+) incelenmiş ve enzim aktivitesini önemli ölçüde etkiledikleri belirlenmiştir. Hindiba (Cichorium intybus'un L.)'dan elde edilen myrosinaz enziminin kozmetikte kullanılabilirliliği araştırılmıştır. Çalışmada saf myrosinaz enzimi içeren krem oluşturulmuş ve karışım güneş lekesi ve benzeri cilt sorunları olan 10 gönüllü denek üzerinde 20 gün süreyle uygulanmıştır. Belirlenen gün sonunda deneklerde mevcut olan lekelerin şiddetinde kısmi azalmalar gözlenmiştir.Keywords : Cichorium intybus L, hindiba, myrosinaz, saflaştırma, kozmetik ürünler