- Selçuk Üniversitesi Fen Fakültesi Dergisi
- Vol: 45 Issue: 1
- Escherichia coli’de Yenibileşenli İnterferon beta Salgılanmasında Sinyal Peptidi Kullanımı Üzerine b...
Escherichia coli’de Yenibileşenli İnterferon beta Salgılanmasında Sinyal Peptidi Kullanımı Üzerine bir Derleme
Authors : Mehmet Öztürk, Yakup Ermurat
Pages : 10-21
View : 10 | Download : 2
Publication Date : 2019-04-30
Article Type : Review
Abstract :: Rekombinant interferon beta (rİFN-β) proteini çeşitlerinden rİFN-β1a ve rİFN-β1b üretimi için benzer süreçler ile ökaryotik ve prokaryotik ekspresyon sistemleri kullanılmaktadır. Ökaryotik ekspresyon sistemleri ile üretilen rİFN-β1a’nın saflaştırılmasında zorlukların yaşanması ve biyolojik aktivitesinin etkilenmesi bu süreçler ile rekombinant protein üretimini güçleştirmektedir. Prokaryotik ekspresyon sistemlerinin kullanıldığı rİFN-β1b üretiminde ise saflaştırma ve aktivite sorunlarının daha az gerçekleştiği belirlenmiştir. Prokaryotik bakterilerden Escherichia coli ’de bulunan ürün salgılama özelliğinin daha iyi kullanılması, bu sistemin rİFN-β1b üretiminde daha fazla tercih edileceğini göstermektedir. Rekombinant proteinlerin üretildikleri konakçı hücreden dışarı salgılatılacak şekilde yapı tasarlanması durumunda, saflaştırma sırasında E. coli konakçı hücreler parçalanmayacağından ürün saflaştırma işlemlerini kolaylaştıracağı öngörülmektedir. Tip I ve tip II salgılama sistemine sahip olan E. coli ’nin rİFN-β1b proteinlerinin üretiminde kullanımı, bu konakçıda üretilen rİFN-β1b’nin hücre dışına salgılatılmasında saflaştırma ve aktivite sorunlarını azaltacağı, ayrıca rİFN-β1b’nin konakçı hücreye yapacağı toksik etkininde ortadan kalkacağı tahmin edilmektedir. Bu amaçla E. coli üretim sistemindeki dezavantajları gidermek için Sec sinyal peptidi olan PelB sinyal peptidine ilave olarak Tat tipi sinyal peptidi olan DmsA sinyal peptidi’nin pET22b ifade vektörüne aktarılmasıyla rİFN-β1b proteinlerinin hücre dışına salgılatılması işlemi gibi çeşitli yaklaşımlar tasarlanmaktadır. Bu derlemede, İFN’ların özelliklerine, rİFN-β’nın klinik uygulamalarına ve rİFN-β1b üretim yöntemleri ile ilgili yapılmış araştırmalara dayalı bilgi ve ve rİFN-β1b’nin E. coli konakçı hücrelerinde üretilmesi sürecinde sinyal peptidlerinin kullanımı ile ilgili bilgilere dikkat çekilmiştir.Keywords : Rekombinant interferon beta salgılanması, sinyal peptidler, periplazmik protein